在细胞生物学、免疫研究等领域，高质量的肺组织单细胞悬液是后续流式分析、单细胞测序的核心基础。传统手动制备方法易因研磨不均、消化失控导致细胞活性低、杂质残留多，而借助单细胞悬液制备仪的标准化流程，可显著提升悬液质量与实验效率。本文将详细介绍基于单细胞悬液制备仪的小鼠肺组织单细胞悬液制备全流程，为相关实验提供可复用的操作范式。

　　实验材料：健康小鼠一只、解剖工具一套、单细胞悬液制备仪一台、消化液1瓶、终止液1瓶、1XPBS 1瓶 、70um滤网1个、离心机1台;流式细胞仪用于活率检测

　　实验目的：通过单细胞悬液制备仪的标准化操作，实现小鼠肺组织的高效解离，获得无明显组织碎片、细胞粘连少的单细胞悬液，同时最大限度保留细胞活性(目标活率≥95%)，为后续流式细胞分析、单细胞测序、细胞功能检测等实验提供合格样本，解决传统手动制备方法中 “细胞活率低、纯度差、重复性弱” 的痛点。

　　组织样品单细胞悬液制备的实验步骤：

　　1.选取健康小鼠1只，断颈处死，打开腹腔，取出肺器官

　　2.用1XPBS洗涤肺器官

　　3.选取28.5mg肺组织，用眼科剪剪成糊状

　　4.放入加满消化液的离心管中

　　5.放入单细胞悬液制备仪的管架上，管架预热5分钟

　　6.选择模块4进行实验，实验结束后仪器自动停止

　　7.用70um滤网过滤，加入终止液终止消化(消化液：终止液1：2)

　　8.放到离心机上重悬

　　9.重悬后弃掉上清，加入少量PBS打散混匀底部沉淀细胞

　　10.吸取200ul单细胞悬液，加入PI避光染色10分钟

　　11.后续进行流式分析，细胞活率为98.67%

　　实验制备的注意事项：

　　1. 机器使用时应保证位置放置平稳

　　2. 机器适于短时、间歇工作，请勿长时间连续使用,工作时间建议不超过 8 小时。

　　3. 为保护机器内部的电路和机械，禁止用流水冲洗，而只能用湿布擦拭。

　　4. 使用过程中如有任何异常，应立即断电，交由专业人员处理。

　　5. 机器必须放置在平整的实验台上(最好是石质台面)，以防设备工作时振动。

　　6. 一定要时刻保持警惕状态，请一切检查好之后再开启动!

　　组织样品单细胞悬液制备的实验效果：

小鼠肺组织样品的取材

小鼠肺组织细胞悬液制备实验前

小鼠肺组织制备实验后

小鼠肺组织单细胞悬液制备实验结果分析：活率98.67%

　　从实验结果来看，借助单细胞悬液制备仪的精准控温与标准化消化模块，最终获得的小鼠肺组织单细胞悬液活率高达 98.67%，远超手动制备(通常活率 80%-90%)，且悬液中无明显组织碎片，完全满足流式分析对样本纯度与活性的严苛要求。这一结果印证了单细胞悬液制备仪在动物组织单细胞处理中的核心价值 —— 它不仅通过管架预热、专属模块设置简化了操作流程，还避免了人为操作差异导致的实验误差，让肺组织单细胞悬液制备从 “依赖经验” 转向 “标准化可控”。

　　无论是基础科研中的细胞表型分析，还是临床前研究中的肺脏疾病机制探索，单细胞悬液制备仪都能为高质量样本制备提供稳定支持，成为提升实验效率与数据可靠性的关键工具。